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植物原花青素（OPC）含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)（分光光度法）

貨號(hào)：LE-1-185

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義：

原花青素（ Oligomeric Proantho Cyanidins，OPC）是一類黃烷醇單體及其聚合體的多酚化合物，廣泛存在于植物的各種器官中，具有極強(qiáng)的抗氧化性和清除自由基的作用，廣泛的應(yīng)用于醫(yī)藥，食品，化妝品，保健品行業(yè)。

測(cè)定原理：

在酸性條件下，植物原花青素 A 環(huán)上的間苯二酚和間苯三酚與香草醛發(fā)生縮合反應(yīng)，產(chǎn)生有色化合物， 在 500nm 處有特征吸收峰，測(cè)定 500nm 光吸收值可計(jì)算原花青素的含量。

試劑組成和配制：

提取液：60%乙醇，自備，4℃保存。

試劑一：液體 8%鹽酸 20mL×1 瓶，4℃保存。

試劑二：粉劑 0.2g×1 瓶 ，4℃避光保存，臨用前加 20mL 甲醇溶解。 

測(cè)定工作液：臨用前按照用量將試劑一和試劑二按照 1:1 混合。

空白工作液：臨用前按照用量將試劑一和甲醇按照 1:1 混合。

自備儀器和用品：

天平 、 常溫離心機(jī) 、可見(jiàn)分光光度計(jì) 、 1 ml 玻璃比色皿 、蒸餾水 、鹽酸 、無(wú)水乙醇和甲醇。

OPC 提?。?/span>

稱取約 0. 1g 樣本，加入 2ml 提取液，勻漿后，60℃振蕩提取 2h，10000g，25℃, 離心 10min，取上清待測(cè)。

測(cè)定操作表

OPC 計(jì)算公式：

標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.0194x+0.0006，R²=0.999

OPC 含量（mg /g  鮮重）=(ΔA-0.0006）÷0.0194×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W)×10^-3

= 0.515×(ΔA -0.0006 ) ÷ W

V 樣總：加入提取液體積，2ml；V 反總：反應(yīng)總體積，1ml；V 樣：反應(yīng)中樣品體積，0.2ml； W：樣品 質(zhì)量，g

注意事項(xiàng)：

1、配制好的試劑二應(yīng)盡快使用，4℃保存時(shí)間不超過(guò)一個(gè)月。

2、 吸光度變化應(yīng)該控制在 0.05~0.8 之間 。否則加大樣品量或稀釋樣品，注意計(jì)算公式中參與計(jì)算的稀釋倍數(shù)要相應(yīng)改變。

3、最低檢出限為 10μg/g。