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土壤蔗糖酶活性檢測試劑盒說明書（可見分光光度法）

產(chǎn)品簡介：

S-SC 能夠水解蔗糖變成相應(yīng)的單糖而被機(jī)體吸收，其酶促作用產(chǎn)物與土壤中有機(jī)質(zhì)、氮、磷含量，微生物數(shù)量及土壤呼吸強(qiáng)度密切關(guān)，是評價(jià)土壤肥力的重要指標(biāo)。

S-SC 催化蔗糖降解產(chǎn)生還原糖，進(jìn)一步與 3，5－二硝基水楊酸反應(yīng)，生成棕紅色氨基化合物， 在 540nm 有特征光吸收，在一定范圍內(nèi) 540nm 光吸收增加速率與 S-SC 活性成正比。

試驗(yàn)中所需的儀器和試劑：

可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、冰、甲苯（不允許快遞）和蒸餾水。

產(chǎn)品內(nèi)容：

試劑一：甲苯 5mL×1 瓶，4℃保存；（自備）

試劑二：液體 15mL×1 瓶，4℃保存；

試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前每瓶加入 40mL 蒸餾水充分溶解備用；

試劑四：液體 35mL×1 瓶，4℃保存；

標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1 支，4℃保存，含 10mg 無水葡萄糖（干燥失重<0.2%），臨用前加入 1mL 蒸餾水溶解備用，4℃可保存 1 周，或者用飽和苯甲酸溶液溶解，可保存更長時(shí)間。

標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備：將標(biāo)準(zhǔn)品用蒸餾水稀釋至 0.5、0.4、0.3、0.2、0.1mg/mL。

操作步驟：

充分混勻，放入沸水浴中煮沸 5min（蓋緊，以防止水分散失），流水冷卻后充分混勻。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立：540nm 處蒸餾水調(diào)零，讀標(biāo)準(zhǔn)管吸光值，計(jì)算ΔA=A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管。

以濃度（y）為縱坐標(biāo)，吸光度 A（x）為橫坐標(biāo)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。

樣品處理：540nm 處蒸餾水調(diào)零，讀吸光值 A。計(jì)算ΔA=A 測定管-A 對照管。每個(gè)測定管需設(shè)一個(gè)對照管。

S-SC 活力的計(jì)算：

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，將ΔA 帶入公式中（x），計(jì)算樣品濃度 y（mg/mL）。

單位的定義：每天每 g 土樣中產(chǎn)生 1mg 還原糖定義為一個(gè) S-SC 活力單位。

S-SC 活力(U/g 土樣)=y×10×V 反總÷W÷T=101.5×y

10：稀釋倍數(shù)；T：反應(yīng)時(shí)間，1d；V 反總：反應(yīng)體系總體積：1.015mL；W：樣本質(zhì)量，0.1g。