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貨號：LE-1-318

正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。

產品內容：

提取液一：液體 110mL×1 瓶，4℃保存。

提取液二：液體 70mL×1 瓶，4℃保存。

試劑一：濃硫酸 60mL，自備。

試劑二：液體 3mL×1 瓶，4℃保存。

試劑三：液體 5mL×1 瓶，4℃避光保存。

標準品：粉劑×1 支，10mg  半乳糖醛酸，4℃保存。臨用前加入 0.943mL 提取液二，配成 50μmol/mL的標準液

產品說明：

果膠是植物細胞壁主要組成成分之一，分為水溶性果膠和不溶性果膠，不溶性果膠為原果膠（堿溶性果膠）。果膠是一種天然高分子化合物，具有良好的膠凝化和乳化穩(wěn)定作用，已廣泛用于食品、醫(yī)藥、日化及紡織行業(yè)。

原果膠在稀酸中水解為可溶性果膠，與原有的可溶性果膠進一步轉化為半乳糖醛酸，產物在強酸中與咔唑縮合生成紫紅色化合物，在 530 nm 處有特征吸收峰。

試驗中所需的儀器和試劑：

可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、濃硫酸、1mL 玻璃比色皿、可調式移液槍、研缽/勻漿器和蒸餾水。

操作步驟：

一、總果膠的提?。?/span>

將組織樣品搗碎，按照樣品質量(g)和提取液一體積(mL)為 1: 20 的比列（建議取約 0.05g 樣品， 加入 1mL 提取液一），置于 90℃恒溫水浴鍋中浸提 30min，取出冷卻后于 5000g、25℃離心 10min，去掉上清，沉淀中再加入 1mL 提取液一重復操作一次，離心后去上清，沉淀中加入 1mL 提取液二， 置于 90℃恒溫水浴鍋中水解 1h，取出冷卻后于 8000g、25℃離心 15min，取上清液待測。

二、測定步驟：

1、分光光度計預熱 30min 以上，調節(jié)波長至 530nm，蒸餾水調零。

2、將 50μmol/mL 標準液用提取液二稀釋為 1、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125 μmol/mL 的標準溶液備用。

3、操作表：

1、 標準曲線的繪制：

以各個標準溶液的濃度為 x 軸，其對應的△A 標準為 y 軸，繪制標準曲線，得到標準方程 y=kx+b， 將△A 測定帶入方程得到 x（μmol/mL

2、 總果膠含量的計算：

總果膠含量(μmol /g  鮮重)= x×V 提取液二÷W =x÷W

V 提取液二：加入提取液二的體積，1mL；W：樣本鮮重，g。

注意事項：

1、 濃硫酸具有強腐蝕性，操作時需特別注意，90℃加熱、冷卻后再打開蓋子，以防液體飛濺燒傷。

2、 若吸光值超過 0.8，可將樣本提取液二進行適當稀釋再進行測定，并在計算公式中乘以稀釋倍數。