自拍偷自拍亚洲精品第|精品无码一级黄色视频|国产亚洲一区二区不卡片|色综合天天综合网国产人|天码精品专区一区二区三区|日韩免费无码专区精品观看|国产女主播精品大秀系列在线|国产欧美一区二区三区另类精品

離子結(jié)合型果膠(ISP)含量試劑盒說明書（分光光度法）

貨號：LE-1-328

正式測定前取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

果膠是構(gòu)成細胞初生壁和中膠層的主要成分，主要由原果膠、果膠酸甲酯和果膠酸組成。 果膠中含有半乳糖醛酸、乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等， 是許多高等植物細胞壁中含量最  豐富的多糖成分， 其獨特的物理、化學(xué)性質(zhì)影響著植物源食品的口感和品質(zhì)。果膠間以 Ca2+  橋及其他離子鍵、氫鍵、糖苷鍵、酯鍵和苯環(huán)偶聯(lián)的方式交聯(lián)，  通過不同的抽提方法可以提  取各種形式的果膠，如水溶性果膠（WSP）、離子結(jié)合型果膠（ISP）和共價結(jié)合果膠（CSP）。 

測定原理：

利用帶有螯合劑的酸溶液提取離子結(jié)合型果膠（ISP） ，采用咔唑比色法測定果膠含量。果 膠水解成半乳糖醛酸，在硫酸溶液中與咔唑試劑進行縮合反應(yīng)，  生成物質(zhì)在 530 nm 處有最大吸收峰。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計、水浴鍋、可調(diào)式移液器、 1mL 玻璃比色皿、  80％乙醇、丙酮、濃硫酸（不 允許快遞）、研缽和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

試劑一：液體 50mL× 1 瓶， 4℃保存。

試劑二：液體 50mL× 1 瓶， 4℃保存。

試劑三：標準液 1mL× 1 支， 4℃保存。

試劑四：液體 5 mL× 1 瓶， 4℃保存；

樣品的前處理：

1 、 細胞壁的提?。?nbsp;取約 0.3g 樣本， 加入 1mL 80％乙醇，室溫快速勻漿， 95℃水浴 20min， 冷卻至室溫，4000g  25℃離心 10min，棄上清。沉淀加入 1.5mL80％乙醇和丙酮各洗一  遍（渦旋振蕩 2min 左右， 4000g  25℃離心 10min，棄上清即可），沉淀即為粗細胞壁，  加入 1mL 試劑一（去除淀粉）浸泡 15 小時， 4000g  25℃離心 10min，棄上清，將沉淀  干燥，稱重得細胞壁物質(zhì)（CWM）。

2 、 ISP 的提取：稱取烘干的 CWM 3mg，加入 1mL 試劑二，充分勻漿(若烘干物質(zhì)質(zhì)地堅硬， 可先研碎后再加入 1mL 試劑二勻漿， 或者用勻漿器勻漿) 。8000g 4℃離心 10min，取上清液待測。

測定步驟：

1、分光光度計預(yù)熱 30min 以上， 調(diào)節(jié)波長至 530nm 處， 蒸餾水調(diào)零； 試劑三和試劑四 37℃ 預(yù)熱 10min 以上；

2、操作表：

混勻

混勻 95℃水浴 5min 后， 530nm 處讀取吸光值，   空白管、標準管、對照管和測定管吸光值分 別記為 A1 、A2 、A3 和 A4。

若 A 大于 2， 需將待測樣本用蒸餾水稀釋（可稀釋 10 倍或 20 倍）。

注意：空白管和標準管只要做一管，每個測定管需設(shè)一個對照管。

ISP 含量計算：

ISP 含量(mg /g  干重)= (C 標準×V1) ×(A4-A3)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2) ×稀釋倍數(shù) 

=0.05×(A4-A3)÷(A2-A1)÷W×稀釋倍數(shù)

C 標準： 標準管濃度，0.05mg/mL；V1：加入樣本體積，0.1mL；V2：加入提取液體積， 1mL； W：樣本干重， g。

注意：最低檢測限為 50μg /g  干重